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从样本到结果:福氏志贺氏菌qPCR检测全流程详解

发表时间:2026-01-26

福氏志贺氏菌的qPCR检测是一项标准化程度较高的分子检测流程,通常在具备相应条件的实验室中进行。整个过程可分为样本采集、核酸提取、体系配制、扩增检测与结果分析五个主要环节。


首先,根据检测目的选择合适的样本类型,如粪便、肛拭子或食品、水源等环境样本。样本需按照规范采集并妥善保存,避免反复冻融或长时间暴露于高温环境,以维持微生物核酸的完整性。


随后进入核酸提取阶段。通过专用试剂盒或自动化提取设备,从样本中分离出总DNA。此步骤对后续检测的稳定性具有重要影响,操作需严格遵循实验规程,防止交叉污染。


接下来是反应体系的配制。将提取的DNA模板、特异性引物、荧光标记探针、酶混合液及缓冲成分按比例加入PCR管或板中。所有操作建议在洁净工作台内完成,并设置阴性对照和阳性对照,以监控实验有效性。


配制完成后,将反应管放入实时荧光定量PCR仪中运行预设程序。仪器通过多阶段温度循环实现目标片段的扩增,并同步采集荧光信号。


最后,依据扩增曲线和Ct值进行结果判读。专业人员结合对照组表现与判定标准,确认样本中是否检出福氏志贺氏菌特异性核酸序列。整个流程通常在数小时内完成,为后续处理提供参考依据。

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