一、产品基础信息
产品名称:病毒探针法qRT-PCR试剂盒(不含内参)(英文简称:Bovine Viral Diarrhea Virus Probe-based qRT-PCR Kit, No Internal Control)。产品规格:一千五百微克/套,含全套检测试剂(不含内参试剂),可满足指定次数科研检测需求。
检测原理:基于探针法荧光定量逆转录PCR技术,针对牛病毒(BVDV)特异性5'UTR基因设计引物与TaqMan探针,先通过逆转录过程将病毒RNA转化为cDNA,再通过PCR扩增特异性结合目标基因,利用Taq DNA聚合酶的外切核酸酶活性切断探针,释放荧光信号,荧光信号强度与病毒基因拷贝数呈正相关,实现对样本中病毒的精准定性及定量检测。
外观与组成:试剂均为澄清透明液体,无沉淀、分层及肉眼可见杂质,无核酸酶、无热原污染;配套含qRT-PCR预混液、特异性引物、特异性探针、阳性对照、阴性对照,无需额外配制核心试剂,可直接用于实验。适配仪器:兼容ABI 7500、Roche LightCycler、Bio-Rad CFX96等主流荧光定量PCR仪,无需专用设备。
二、理化特性与储存运输
试剂可直接使用,摇匀后体系均一稳定,无难溶杂质,能有效维持逆转录及PCR反应的稳定性。适配常规qRT-PCR实验条件,反应体系pH稳定,退火温度可在55-60℃间根据仪器型号微调,确保扩增效率。储存条件为-20℃避光密封保存,严禁4℃及以上长期存放,避免反复冻融以防试剂降解、荧光信号衰减;运输采用干冰冷链,全程控温,避免剧烈震荡和阳光直射。未开封试剂自验收之日起可稳定保存6个月,开封后需分装冻存并在1个月内用完,防止试剂失效。
三、质量控制指标
严格把控试剂纯度,无核酸酶、杂菌污染及荧光信号干扰杂质,确保反应样本的完整性与无污染;特异性强,仅与牛病毒目标基因结合,与牛冠状病毒、牛轮状病毒等其他相关病毒无交叉反应,无假阳性;重复性良好,同一批次多次检测偏差小,批间一致性优;灵敏度高, 检测限可达低拷贝数,可精准检测微量病毒基因,无假阴性;试剂在规定条件下荧光活性、特异性稳定,无降解失效,保障实验顺利进行。
四、适用场景
适用于生命科学、兽用相关科研实验,可检测牛相关样本及环境样本中的牛,适配病毒分布研究、环境病毒监测、病毒分子生物学研究、生物制品相关科研等场景,可满足批量样本检测需求,为牛病毒相关科研工作提供精准的数据支撑,助力相关研究的高效开展。
五、使用操作建议
样本需按常规方法提取RNA,确保纯度达标、无抑制剂,避免RNA降解;实验前将试剂盒从-20℃取出,室温解冻后轻柔混匀,离心去除管壁残留试剂,防止试剂浪费。荧光定量PCR仪预热30分钟以上,按说明书依次加入试剂和RNA样本,设置好逆转录及PCR反应程序,严格控制反应温度与时间,完成荧光信号采集。根据荧光曲线、Ct值及阴阳性对照,按科研标准判读结果,实现病毒的定性与定量分析。实验时需佩戴手套、护目镜等防护用品,避免试剂接触皮肤黏膜,防止试剂污染及核酸交叉污染;试剂仅用于科研,不可重复使用,过期试剂严禁使用,实验废弃物按科研规范处理。
六、产品优势
操作简便,试剂配套齐全且不含内参试剂,步骤清晰,无需复杂前期准备,新手可快速上手,大幅节省实验时间;检测精准,特异性与灵敏度高,有效避免假阴、假阳性结果,减少实验误差,确保检测数据可靠;适配性广,兼容主流荧光定量PCR仪及各类相关样本,适用多种科研场景;稳定性强,试剂活性稳定,储存运输便捷,批间差异小,实验结果可追溯;一千五百微克/套的规格可满足批量检测需求,性价比高,无需频繁采购,适配科研实验批量检测的实际需求。