重组人激肽释放酶2(KLK2)是通过基因工程技术表达纯化的活性蛋白,属于丝氨酸蛋白酶家族,具有特异性酶促活性及底物结合功能,结构稳定、活性可控,广泛应用于基础科研、酶学机制分析、分子互作探究及蛋白功能研究等场景,能满足各类科研实验的精准需求。
一、基本信息
该蛋白对应人KLK2基因(Entrez Gene ID: 3816),UniProt编号P41174,编码全长约261个氨基酸,理论分子量约29.5 kDa;带有N端His标签后,分子量约为32.0-33.0 kDa,可通过SDS-PAGE清晰检测识别,天然状态下多以单体形式存在,含保守酶活性结构域及底物结合位点。
表达系统主流采用大肠杆菌(E. coli),部分产品可选用HEK293哺乳动物细胞表达,无动物源成分,能 程度保留蛋白天然构象与酶促活性。N端His标签设计便于后续亲和纯化及实验操作,可根据科研需求选择保留或切除标签。
该蛋白基因别名包括KLK2、Kallikrein 2、hK2,氨基酸序列高度保守,含酶活性调控位点及底物结合结构域,是科研实验中常用的标准丝氨酸蛋白酶类蛋白,参与多种蛋白降解及生理过程调控。
二、质量参数
纯度经亲和层析、凝胶过滤等多步纯化工艺处理,通过SDS-PAGE考马斯亮蓝染色检测,纯度≥95%,无明显杂带,能有效避免杂蛋白对实验结果的干扰,符合科研实验对蛋白纯度的严格要求。
酶活性稳定,可通过其特异性蛋白降解能力检测,酶活单位通常为0.2-0.6 U/μg,能满足酶学功能实验需求,保障实验结果可靠。
产品状态分为冻干粉末和无菌过滤液体两种,冻干品无防腐剂,液体品多为无色至淡黄色透明状,内毒素含量<1.0 EU/μg,符合细胞实验及酶学实验标准。
三、配方与保存
冻干品通常由0.2μm过滤的PBS缓冲液(pH 7.4,含海藻糖)冻干制备,添加保护剂维持蛋白稳定性,防止冻干过程中蛋白变性及酶活性流失。
冻干品可常温运输,液体品需4℃冷藏运输,全程避免温度波动。储存时,冻干品在-20℃至-70℃可稳定保存12个月;液体品收到后需立即分装,-80℃长期保存可稳定1年,4℃短期存放可维持1-2周,严禁反复冻融,建议按单次使用量分装。
冻干品复溶时,建议用无菌PBS溶解,复溶浓度建议为200 μg/mL,复溶后轻柔混匀,4℃冷藏,1个月内用完,长期保存需分装后置于-80℃。
四、核心功能与应用
KLK2蛋白含保守的丝氨酸蛋白酶活性结构域,可特异性识别并降解特定氨基酸序列的蛋白底物,参与蛋白降解及相关生理过程调控,是蛋白降解调控网络中的关键分子,可与多种底物蛋白、调控分子相互作用。
在科研应用中,可用于基础机制研究,探究其在蛋白降解、酶学调控中的作用;可作为标准蛋白用于酶学实验、蛋白互作实验,筛选与其结合的底物及调控分子,构建调控网络;还可用于SDS-PAGE、质谱分析等实验,作为蛋白分子量标准及活性验证对照,同时可用于相关检测方法的建立与优化。
五、使用注意事项
实验前需短暂离心,避免蛋白黏附管壁造成损失;稀释时需使用配套缓冲液,严格控制稀释比例,轻柔混匀,防止蛋白聚集失活。操作过程中需保持无菌环境,避免外源污染影响实验结果,妥善储存与处理。