重组人CD73蛋白(胞外-5'-核苷酸酶)是通过基因工程技术表达纯化的活性蛋白,属于核苷酸酶家族,具有核苷酸水解及信号调控相关功能,结构稳定、活性可控,广泛应用于基础科研、分子互作探究及酶学机制分析等场景,能满足各类科研实验的精准需求。
一、基本信息
该蛋白对应人NT5E基因(Entrez Gene ID: 4907),UniProt编号P21589,编码全长约548个氨基酸,理论分子量约62.1 kDa;若带有C端His标签,分子量约为64.6-65.6 kDa,可通过SDS-PAGE清晰检测识别,天然糖基化形式表观分子量可达70-80 kDa。
表达系统主流采用HEK293哺乳动物细胞,部分产品可选用大肠杆菌表达,无动物源成分,能 程度保留蛋白天然构象与生物活性。常见融合标签为C端His标签,部分产品可提供无标签版本,标签设计便于后续亲和纯化及实验操作,可根据科研需求选择保留或切除。
该蛋白基因别名包括NT5E、CD73、5'-nucleotidase,其氨基酸序列高度保守,含核苷酸结合结构域及催化活性中心,是科研实验中常用的标准酶类蛋白,参与多种细胞生理过程调控。
二、质量参数
纯度经亲和层析、凝胶过滤等多步纯化工艺处理,通过SDS-PAGE银染或考马斯亮蓝染色检测,纯度≥95%,无明显杂带,能有效避免杂蛋白对实验结果的干扰,符合科研实验对蛋白纯度的严格要求。
生物活性稳定,可通过其对5'-AMP的水解能力检测,比活性通常为10-30 U/mg,能满足酶学及功能学实验需求,保障实验结果可靠。
产品状态分为冻干粉末和无菌过滤液体两种,冻干品无防腐剂,液体品多为无色透明状,内毒素含量<1.0 EU/μg,符合细胞实验及蛋白功能研究标准。
三、配方与保存
冻干品通常由0.2μm过滤的PBS缓冲液(含EDTA)冻干制备,部分产品添加BSA作为载体蛋白,维持蛋白稳定性;液体品缓冲体系多为20 mM Tris-HCl(pH 8.0),含0.15 M NaCl、50%甘油,可有效防止蛋白变性及活性流失。
冻干品可常温运输,液体品需4℃冷藏运输,全程避免温度波动。储存时,冻干品在-20℃至-70℃可稳定保存12个月;液体品收到后需立即分装,-80℃长期保存可稳定1年,4℃短期存放可维持1-2周,严禁反复冻融,建议按单次使用量分装。
冻干品复溶时,建议用无菌PBS溶解,复溶浓度建议为200 μg/mL,复溶后4℃冷藏,1个月内用完。
四、核心功能与应用
CD73蛋白含保守的催化结构域,可特异性水解5'-核苷酸(主要为5'-AMP)生成腺苷,参与核苷酸代谢及信号传导过程,是核苷酸代谢调控网络中的关键分子,可与多种信号蛋白相互作用,参与相关生理过程调控。
在科研应用中,可用于基础机制研究,探究其在核苷酸代谢、信号调控中的作用;可作为标准酶用于酶学实验,分析催化动力学特征,筛选调控其活性的小分子;还可用于SDS-PAGE、质谱分析等实验,作为蛋白分子量标准及活性验证对照,同时可用于相关检测方法的建立与优化。
五、使用注意事项
实验前需短暂离心,避免蛋白黏附管壁造成损失;稀释时需使用配套缓冲液,严格控制稀释比例,防止蛋白聚集失活。操作过程中需保持无菌环境,避免外源污染影响实验结果。该产品仅用于科研用途,需严格按照实验规范操作,妥善储存与处理。