Recombinant Human POLE2 Protein是通过基因重组技术制备的人源蛋白,属于DNA聚合酶ε家族成员,作为DNA聚合酶ε的重要亚基,具有特异性DNA结合与聚合辅助活性,是基础生物研究中探究DNA复制、DNA损伤修复机制的重要实验材料,应用广泛且研究价值显著。其氨基酸序列高度保守,对应UniProt相关访问号,核心结构与功能特性稳定,可满足各类基础实验的使用需求,是探究细胞内DNA代谢调控网络的关键材料。
该蛋白常规采用大肠杆菌或HEK293细胞表达系统制备,N端通常带有His标签,便于通过亲和层析法进行分离纯化,显著提升纯化效率与蛋白纯度。经SDS-PAGE检测,其纯度可达90%以上,能有效去除宿主蛋白、核酸等杂质,保障实验结果的准确性。该蛋白预测分子量约为58至60 kDa,不同制备工艺下观测分子量略有差异,常见范围在58.5至60.5 kDa之间,与天然人源POLE2蛋白分子量基本一致。
分子结构上,该蛋白包含典型的DNA结合结构域和聚合酶辅助结构域,核心活性位点为特定氨基酸残基,是其发挥DNA结合与辅助聚合功能的关键结构基础。该蛋白无明显糖基化修饰,空间构象稳定,可与DNA聚合酶ε的其他亚基及DNA分子发生特异性相互作用,参与DNA聚合酶复合物的组装与调控,保障细胞内相关生理过程有序运转。
应用场景方面,该蛋白可广泛用于SDS-PAGE、Western Blot(WB)、免疫沉淀、DNA结合检测等基础实验,能与特异性抗体发生特异性结合反应,为研究其分子功能、蛋白相互作用机制、DNA代谢调控规律提供有力支持。部分产品经活性检测,DNA结合活性可满足常规功能学实验需求,能精准反映其天然活性特征。
该蛋白产品形式主要分为冻干粉和液体两种,适配不同实验场景的使用需求。冻干粉由含海藻糖、甘露醇等保护剂的PBS缓冲液冻干制成,可有效保护蛋白活性,延长保存期限;液体形式则溶于含甘油、Tris-HCl等成分的缓冲液中,不含动物源成分和载体蛋白,避免对实验结果产生干扰,保证实验的可靠性。
储存与运输需严格遵循相关要求,运输时采用蓝冰冷藏,避免高温、剧烈震荡,防止蛋白变性失效。短期储存可置于-80℃,长期储存建议分装后置于-80℃,避免反复冻融导致蛋白活性下降。冻干粉在-20℃至-80℃条件下可稳定保存12个月,复溶后的蛋白溶液在4℃至8℃可保存2至7天,分装后-20℃以下可保存3个月。
复溶操作需规范进行,冻干粉使用前先离心,将管壁或管盖的粉末收集至管底,再加入无菌水或对应缓冲液,轻轻吹吸2-3次使其溶解,避免使用涡旋振荡器,防止破坏蛋白空间结构。复溶后建议调整蛋白浓度至0.1-1 mg/ml,便于后续实验操作,使用后需及时冷藏或冷冻保存,避免活性流失。