苏州丰度蛋白生物技术有限公司  
 
Recombinant Human NCOA4 Protein
  • 品牌:Fedprotein
  • 产地:苏州
  • 型号:10ug
  • 货号:FX1076
  • 价格: ¥560/10ug
  • 发布日期: 2026-03-13
  • 更新日期: 2026-04-02
产品详请
产地 苏州
品牌 Fedprotein
货号 FX1076
用途 科研
包装规格 10ug
纯度 %
CAS编号
是否进口
  • 产品名称:Recombinant Human NCOA4 Protein(重组人 NCOA4 蛋白 / ARA70)
  • 基因来源:人源 NCOA4 基因,全长 575 个氨基酸,产品采用 1–575 aa 全长序列,完整保留铁蛋白结合域与自噬衔接功能域。
  • 表达宿主:主流为小麦胚芽无细胞表达系统,部分规格采用 HEK293 哺乳动物细胞;无细胞体系可避免宿主蛋白污染,哺乳动物细胞表达可实现蛋白正确折叠。
  • 融合标签:N 端 GST 标签或 His 标签,适配谷胱甘肽、Ni‑NTA 亲和纯化体系,便于下游分离与检测。
  • 蛋白分子量:理论分子量约 69.7 kDa,SDS‑PAGE 检测条带为 70–75 kDa,无明显降解或杂带。
  • 纯度指标:经 SDS‑PAGE 与 HPLC 双重验证,纯度≥95%,高纯度规格可达 98% 以上,有效降低杂质对结合实验的干扰。

二、结构与功能特性

NCOA4 是定位于细胞质的衔接蛋白,兼具核受体共激活与铁代谢调控双重功能。其 N 端结构域可结合核受体,增强下游基因转录活性;C 端结构域特异性识别铁蛋白重链(FTH1),作为铁蛋白自噬的关键受体,介导铁蛋白向溶酶体转运并降解,释放储存铁以维持细胞铁稳态。
重组人 NCOA4 蛋白完整复刻天然蛋白的底物特异性:仅结合铁蛋白 FTH1 亚基,不与其他铁代谢蛋白交叉反应;可与自噬相关蛋白 LC3 相互作用,介导铁蛋白进入自噬溶酶体途径。该蛋白在多种组织中广泛表达,重组版本保留完整铁蛋白结合与自噬衔接活性,适配体外机制研究。

三、生产与质控流程

  1. 基因构建:人工合成人 NCOA4 全长基因,插入 pGEX、pcDNA3.1 表达载体,融合 GST/His 标签,经测序验证序列 匹配人源参考序列。
  2. 表达优化:小麦胚芽无细胞体系采用体外转录翻译,优化反应温度与时间;哺乳动物细胞采用瞬时转染,无血清培养提升可溶性蛋白产量。
  3. 纯化工艺:无细胞体系产物经谷胱甘肽亲和层析捕获目标蛋白,还原型谷胱甘肽洗脱;哺乳动物细胞上清经 Ni‑NTA 亲和层析,咪唑梯度洗脱去除杂蛋白;再经凝胶过滤层析进一步纯化,去除聚集体与标签残留。
  4. 质量控制:每批次产品均进行 SDS‑PAGE 纯度检测、Western Blot 特异性验证、铁蛋白结合活性测定、内毒素检测(≤0.1 EU/μg),确保批次间稳定性与实验重复性。
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