Recombinant Human MRC2 Protein，又称 C-type mannose receptor 2、CD280、Endo180，属于甘露糖受体家族的 I 型跨膜糖蛋白，为科研实验专用重组蛋白试剂，采用真核表达系统制备，适用于体外生化分析、抗体开发与蛋白互作研究，不用于临床场景。
- 产品名称：Recombinant Human MGEA5 Protein（重组人表达抗原 5 蛋白 / 重组人 O‑GlcNAcase）
- 基因来源：人源 MGEA5 基因，编码全长 916 个氨基酸，产品多采用 695‑916 aa 活性核心区域，完整保留 O‑GlcNAcase 与乙酰转移酶双功能域
- 表达宿主：主流为 HEK293 哺乳动物细胞，部分规格采用大肠杆菌（E. coli）表达系统；哺乳动物细胞表达可实现蛋白正确折叠与翻译后修饰，更贴近天然构象
- 融合标签：常见 N‑端 His 标签、His‑Myc 双标签、GST 标签，适配 Ni‑NTA、谷胱甘肽亲和纯化体系，便于下游分离与检测
- 蛋白分子量：理论分子量约 103 kDa，SDS‑PAGE 检测条带与理论值一致，无明显降解或杂带
- 纯度指标：经 SDS‑PAGE 与 HPLC 双重验证，纯度≥95%，高纯度规格可达 98% 以上，有效降低杂质对酶活实验的干扰
二、结构与功能特性
MGEA5 是定位于细胞核与细胞质的双功能蛋白，兼具 O‑GlcNAcase 与组蛋白乙酰转移酶活性，是调控细胞内 O‑GlcNAc 修饰循环的核心因子。其 O‑GlcNAcase 结构域可特异性水解蛋白丝氨酸 / 苏氨酸残基上的 O‑GlcNAc 修饰，乙酰转移酶结构域则催化组蛋白赖氨酸残基乙酰化，协同调控基因转录与信号传导。
重组人 MGEA5 蛋白完整复刻天然酶的底物特异性：仅水解 β‑O‑GlcNAc 糖苷键，不作用于 α‑GlcNAc 或 β‑GalNAc；可识别 p‑硝基苯基‑β‑GlcNAc、4‑甲基伞形酮‑GlcNAc 等人工底物，适配体外酶活定量检测。该蛋白在脑、肝、胰腺等组织中高表达，重组版本保留完整催化活性，可在体外模拟细胞内 O‑GlcNAc 修饰的动态平衡。
三、生产与质控流程
- 基因构建：人工合成人 MGEA5 活性区域基因，插入 pcDNA3.1、pET 系列表达载体，融合 His/Myc/GST 标签，经测序验证序列 匹配人源参考序列
- 表达优化：哺乳动物细胞采用瞬时转染，添加优化培养基与诱导剂，调控表达温度与时间；大肠杆菌系统通过低温诱导（16‑25℃）减少包涵体形成，提升可溶性蛋白产量
- 纯化工艺：细胞裂解后经 Ni‑NTA 亲和层析捕获目标蛋白，咪唑梯度洗脱去除杂蛋白；再经凝胶过滤层析、离子交换层析进一步纯化，去除标签残留与聚集体
- 质量控制：每批次产品均进行 SDS‑PAGE 纯度检测、Western Blot 特异性验证、酶活性测定、内毒素检测（≤0.1 EU/μg），确保批次间稳定性与实验重复性
