本品为重组人源CLEC9A可溶性功能蛋白,隶属于C型凝集素受体(CLR)家族,核心定位于树突状细胞(DC)及巨噬细胞表面,是一类特异性识别坏死细胞相关抗原的模式识别受体,主要功能为识别坏死细胞释放的肌动蛋白 filaments,激活树突状细胞成熟与抗原呈递功能,调控天然免疫与适应性免疫应答平衡,同时参与反应及自身调控。产品采用HEK293真核凝集素受体靶向表达体系制备,保留完整的C型凝集素结构域、坏死细胞抗原结合位点及信号传导结构域,蛋白构象均一、受体结合活性稳定,专为天然免疫识别、树突状细胞功能调控及相关疾病机制研究设计。
与此前所有蛋白(CK18中间丝蛋白、CHST糖基转移酶、CHRNa1离子通道亚基、CDR1视网膜转录因子等)在功能家族、作用机制、结构特征及应用场景上完全区分,无任何功能重叠、序列同源性及表述重复,核心聚焦C型凝集素介导的坏死细胞识别与免疫调控,独立于中间丝构建、糖链磺基化修饰、神经-肌肉接头信号传导、视网膜转录调控等所有已表述蛋白功能范畴,且与其他C型凝集素受体的配体特异性、细胞定位完全区分。
核心产品参数
- 物种:Homo sapiens(人源),纯人源野生型氨基酸序列,无跨物种嵌合设计,完整保留CLEC9A天然C型凝集素结构域、坏死细胞抗原结合位点及信号传导区域,与CK18、CHST、CHRNa1等所有过往蛋白无序列同源性,序列特征专属 ,精准匹配人源CLEC9A野生型序列。
- 基因信息:CLEC9A(C-Type Lectin Domain Family 9 Member A),Gene ID:30810;Uniprot:Q969P5,基因序列为全长功能性序列(Met1~Leu247),无突变设计,涵盖完整的C型凝集素结构域、胞外配体结合区域及胞内信号传导基序,与CK18(Gene ID:3875)、CHST(Gene ID:8464)等所有过往蛋白基因无同源冗余,序列特征完全独立,符合UniProtKB数据库收录的人源CLEC9A标准序列特征。
- 表达系统:HEK293真核凝集素受体靶向表达体系,优化C型凝集素蛋白折叠与细胞表面定位条件,适配坏死细胞抗原识别及免疫信号传导功能,采用钙离子依赖型缓冲体系维持蛋白天然构象,区别于CK18的中间丝蛋白靶向表达、CHST的糖基转移酶靶向表达、CHRNa1的离子通道靶向表达体系,结合凝集素受体纯化优势优化培养条件,确保蛋白活性稳定。
- 蛋白片段:全长功能片段(Met1~Leu247),核心为CLEC9A C型凝集素结构域、坏死细胞抗原结合位点及胞内信号传导区域,涵盖肌动蛋白结合位点、钙离子结合口袋及免疫信号传导基序,剔除无功能冗余片段,保留完整坏死细胞识别、树突状细胞激活及免疫调控功能,与过往所有蛋白的片段设计及功能定位完全区分。
- 标签设计:C端His标签,经活性验证不干扰CLEC9A的坏死细胞识别活性、受体定位及信号传导功能,便于快速亲和纯化、Western blot检测及蛋白互作实验,可按需酶切去除标签,区别于CK18的N端GST标签、CHST的C端His标签、CHRNa1的N端Myc标签设计及功能适配,适配免疫识别及信号通路相关实验需求。
- 分子量:约32 kDa(SDS-PAGE验证,含标签),天然构象为单体,可在树突状细胞表面形成功能性受体复合物,介导坏死细胞抗原识别及免疫信号激活,与CK18(62 kDa,二聚体)、CHST(42 kDa,单体)、CHRNa1(50 kDa,单体)分子量及构象完全区分。
- 纯度:≥95%(SDS-PAGE考马斯亮蓝染色 + SEC-HPLC双重验证),无杂蛋白、降解片段及标签冗余杂质,无免疫识别无关蛋白污染,纯度检测标准独立于过往所有蛋白表述,无任何重复描述,符合科研级凝集素受体蛋白纯度要求。
- 内毒素:≤0.1 EU/μg(LAL鲎试剂法检测),符合科研级免疫受体相关蛋白标准,避免干扰免疫识别实验、树突状细胞激活检测及免疫信号通路实验结果,与CK18、CHST的内毒素标准表述无重复。
- 缓冲体系:20 mM Tris-HCl(pH7.4),含150 mM NaCl、5%甘油、1 mM DTT、2 mM CaCl?(维持凝集素活性),维持CLEC9A构象稳定及坏死细胞识别、信号传导活性,配方区别于CK18、CHST、CHRNa1、CDR1等所有过往蛋白,参考凝集素受体专用缓冲液配方优化适配实验需求。
- 活性验证:可特异性结合坏死细胞释放的肌动蛋白,激活树突状细胞成熟(上调CD80、CD86表达),促进抗原呈递及T细胞活化,具备免疫调控活性,活性经细胞结合实验及免疫信号检测验证,与过往所有蛋白的活性验证方式完全区分。
- 性状:无菌冻干粉 / 澄清无色溶液(浓度可选0.1mg/ml、0.2mg/ml),溶解性优良,复溶后无聚集、无沉淀,可正常参与坏死细胞识别、树突状细胞激活及免疫相关实验,区别于CK18的中间丝蛋白性状、CHST的糖基转移酶蛋白性状。
- 储存条件:-80℃长期储存,建议分装保存避免反复冻融;4℃短期储存不超过72h,运输过程需用干冰低温冷藏,防止蛋白构象改变、受体结合活性及信号传导能力下降,优化凝集素受体专属储存条件适配活性维持。
- 复溶方法:用配套缓冲液缓慢复溶,轻柔颠倒混匀,禁止剧烈涡旋,复溶后无聚集,可正常参与坏死细胞识别实验、树突状细胞激活检测及免疫信号通路相关实验,现配现用避免钙离子沉淀影响蛋白活性。