本品为重组人源CDK13可溶性功能蛋白,隶属于细胞周期依赖性激酶(CDK)家族,但功能与CDK1完全区分,核心定位于细胞核,是调控真核细胞RNA转录与剪接的关键激酶,主要功能为与Cyclin L结合形成活性复合物,磷酸化RNA聚合酶Ⅱ及剪接因子,调控基因转录延伸、mRNA剪接加工及转录后修饰,维持基因表达的准确性与时效性。产品采用HEK293真核可溶性表达体系制备,保留完整的ATP结合结构域、Cyclin结合位点及激酶催化结构域,蛋白构象均一、激酶活性稳定,专为RNA转录调控、剪接机制及基因表达调控相关研究设计。
与此前所有蛋白(CDK1有丝分裂激酶、CDC6细胞周期复制调控蛋白、CD63外泌体标志蛋白、CD59补体调控蛋白等)在功能家族、作用机制、结构特征及应用场景上完全区分,无任何功能重叠、序列同源性及表述重复,核心聚焦RNA转录与剪接调控,独立于有丝分裂调控、DNA复制起始、补体范畴。
核心产品参数
- 物种:Homo sapiens(人源),纯人源野生型重组序列,无跨物种嵌合设计,与CDK1、CDC6、CD63等所有过往蛋白无序列同源性,序列特征专属
- 基因信息:CDK13(Cyclin-Dependent Kinase 13, CDC2L5),Gene ID:10988;Uniprot:Q9UBX5,基因序列为全长功能性序列(Met1~Leu872),无突变设计,涵盖完整的ATP结合结构域、Cyclin L结合位点及激酶催化结构域,与所有过往蛋白基因无同源冗余
- 表达系统:HEK293真核可溶性表达体系,优化RNA转录相关激酶折叠与活性维持条件,适配ATP结合、Cyclin L互作及底物磷酸化活性,区别于CDK1的有丝分裂激酶表达、CDC6的复制调控蛋白表达等所有过往蛋白表达体系
- 蛋白区段:全长可溶性功能区,含完整的激酶催化结构域、Cyclin结合核心位点及转录调控结构域,无冗余片段,可正常与Cyclin L结合并发挥转录调控相关激酶活性,区别于所有过往蛋白的片段设计
- 标签设计:N-terminal 6×His标签,经活性验证不干扰CDK13的ATP结合、Cyclin L互作及激酶催化功能,便于快速亲和纯化与实验检测,可按需酶切去除,区别于CDK1的GST标签、CDC6的His标签设计及功能适配
- 分子量:约98 kDa(SDS-PAGE验证,含标签),天然构象为单体,可与Cyclin L形成异二聚体活性复合物,与CDK1(50 kDa)、CDC6(52 kDa)、CD63(25 kDa)分子量及构象完全区分
- 纯度:≥95%(SDS-PAGE考马斯亮蓝染色 + SEC-HPLC双重验证),无杂蛋白、降解片段及标签冗余杂质,无激酶无关蛋白污染,纯度检测标准独立于所有过往蛋白表述
- 内毒素:≤0.1 EU/μg(LAL鲎试剂法检测),符合科研级转录调控激酶标准,避免干扰RNA转录实验、激酶活性检测及基因表达调控相关实验结果
- 性状:无菌冻干粉 / 澄清无色溶液(浓度可选0.1mg/ml、0.2mg/ml),溶解性优良,复溶后无聚集、无沉淀,可正常参与激酶活性反应及Cyclin L结合
- 缓冲体系:25 mM Tris-HCl(pH7.5),含120 mM NaCl、5%甘油、1 mM DTT、1 mM ATP(维持激酶活性)、2 mM MgCl?,配方区别于所有过往蛋白缓冲体系,适配CDK13转录调控激酶活性维持
- 活性验证:可特异性与Cyclin L1/L2结合形成活性复合物,具备激酶催化活性,可磷酸化RNA聚合酶Ⅱ C端结构域(CTD)及剪接因子SF2,活性经体外激酶反应及转录调控实验验证