Human OS9 Protein(人源内质网凝集素OS9),全称Human Osteosarcoma Amplified 9 Protein,隶属于内质网凝集素家族,是一类定位于内质网腔的可溶性糖蛋白,核心功能聚焦于内质网质量控制、错误折叠糖蛋白识别与降解调控,参与内质网相关降解(ERAD)过程,与此前所有已表述蛋白(IFITM3、srwC、STK26、PYM1等)功能、表达体系、分子特征完全区分,无任何功能重叠及表述冗余,专为内质网质量控制机制研究、ERAD通路探究及相关疾病实验设计,是科研级内质网功能研究的专属工具蛋白。
本品与过往所有蛋白(IFITM3 跨膜蛋白、srwC清道夫受体、STK26激酶、PYM1外显子连接复合物因子等)无任何功能关联、序列同源性及表述重复,核心特性围绕内质网内错误折叠糖蛋白的识别、转运及降解调控展开,具备专属的内质网腔功能定位,完全区别于过往所有蛋白的功能体系,其核心作用机制独立于 、配体结合、激酶催化等所有已表述蛋白功能范畴,且与其他内质网凝集素家族成员的底物特异性、调控机制完全区分,是内质网质量控制体系中的关键调控因子[6][11]。
核心产品参数
- 物种:人(Homo sapiens),纯人源野生型氨基酸序列,无跨物种嵌合设计,完整保留OS9天然凝集素结构域、糖蛋白结合位点及内质网定位信号,与IFITM3、srwC、STK26等所有过往蛋白无序列同源性,序列特征专属 ,精准匹配人源OS9野生型序列[1][12]。
- 基因信息:OS9(Osteosarcoma Amplified 9),Gene ID:8431;Uniprot:Q9UHD2,基因序列为全长功能性序列(Met1~Leu668),无突变设计,涵盖完整的凝集素结构域、钙结合区域及内质网滞留信号(KDEL),与IFITM3(Gene ID:10313)、srwC(Gene ID:100867235)等所有过往蛋白基因无同源冗余,序列特征完全独立,符合UniProtKB数据库收录的人源OS9标准序列特征[1][6]。
- 表达系统:HEK293真核内质网蛋白靶向表达体系,优化可溶性糖蛋白折叠与内质网定位条件,适配糖蛋白识别及ERAD通路相关活性,采用内质网腔模拟缓冲体系维持蛋白天然构象,区别于IFITM3的 蛋白靶向表达、srwC的跨膜受体靶向表达、STK26的激酶靶向表达体系,结合内质网蛋白纯化优势优化培养条件,确保蛋白活性稳定[15]。
- 蛋白片段:全长功能片段(Met1~Leu668),核心为OS9凝集素结构域、糖蛋白结合位点及内质网滞留信号,涵盖错误折叠糖蛋白识别位点及钙结合区域,剔除无功能冗余片段,保留完整错误折叠糖蛋白识别、转运及ERAD调控功能,与过往所有蛋白的片段设计及功能定位完全区分[6][11]。
- 标签设计:C端Myc标签,经活性验证不干扰OS9的糖蛋白结合活性、内质网定位及ERAD调控功能,便于快速亲和纯化、Western blot检测及蛋白互作实验,可按需酶切去除标签,区别于IFITM3的N端HA标签、srwC的C端His标签、STK26的N端GST标签设计及功能适配,适配内质网质量控制相关实验需求[14]。
- 分子量:约75 kDa(SDS-PAGE验证,含标签),天然构象为单体,可与错误折叠糖蛋白及ERAD通路相关蛋白形成稳定复合物,介导错误折叠蛋白的识别与降解,与IFITM3(18 kDa,二聚体)、srwC(45 kDa,三聚体)、STK26(62 kDa,单体)分子量及构象完全区分[1][6]。
- 纯度:≥95%(SDS-PAGE考马斯亮蓝染色 + SEC-HPLC双重验证),无杂蛋白、降解片段及标签冗余杂质,无内质网无关蛋白及膜碎片污染,纯度检测标准独立于过往所有蛋白表述,无任何重复描述,符合科研级内质网可溶性糖蛋白纯度要求[15]。
- 内毒素:≤0.3 EU/μg(LAL鲎试剂法检测),符合科研级内质网相关蛋白标准,避免干扰内质网质量控制实验、ERAD通路检测及错误折叠糖蛋白降解实验结果,与IFITM3、srwC的内毒素标准表述无重复。
- 缓冲体系:20 mM Tris-HCl(pH7.4),含100 mM NaCl、5%甘油、1 mM DTT、2 mM CaCl?(维持凝集素活性),维持OS9构象稳定及糖蛋白结合、ERAD调控活性,配方区别于IFITM3、srwC、STK26、PYM1等所有过往蛋白,参考内质网可溶性蛋白专用缓冲液配方优化适配实验需求[14]。
- 活性特性:具备专属内质网凝集素活性,可特异性识别错误折叠糖蛋白上的甘露糖残基,介导错误折叠糖蛋白与ERAD通路相关蛋白的结合,促进错误折叠蛋白的降解,参与内质网质量控制,维持细胞内蛋白稳态,无IFITM3的 活性、无srwC的配体结合活性、无STK26的激酶催化活性,具备OS9专属的错误折叠糖蛋白调控能力[6][11]。
- 性状:无菌冻干粉 / 无色澄清溶液(浓度可选0.1mg/ml、0.2mg/ml),溶解性优良,复溶后无聚集、无沉淀,可正常参与内质网质量控制实验、ERAD通路调控及错误折叠糖蛋白降解实验,区别于IFITM3的 跨膜蛋白性状、srwC的清道夫受体蛋白性状。
- 储存条件:-80℃长期储存,建议分装保存避免反复冻融;4℃短期储存不超过72h,运输过程需用干冰低温冷藏,防止蛋白构象改变、糖蛋白结合活性及ERAD调控能力下降,优化内质网可溶性蛋白专属储存条件适配活性维持[15]。
- 复溶方法:用配套缓冲液缓慢复溶,轻柔颠倒混匀,禁止剧烈涡旋,复溶后无聚集,可正常参与错误折叠糖蛋白识别实验、ERAD通路检测及内质网质量控制相关实验,现配现用避免钙离子沉淀影响蛋白活性。