Human GST-MDM2 Protein(人源GST标签MDM2蛋白),是将人源MDM2(Mouse Double Minute 2)蛋白与GST(谷胱甘肽S-转移酶)标签融合表达的重组蛋白,与此前所有蛋白(NDUFS3线粒体呼吸链亚基、鸡VP2病毒衣壳蛋白、MAOB氧化酶等)功能完全区分,核心定位为细胞核与细胞质双重分布,核心功能是通过GST标签介导的亲和结合特性,结合MDM2自身的p53结合结构域,
核心产品参数
- 物种/来源:人(Homo sapiens),GST标签与MDM2蛋白均为真核表达,无跨物种嵌合片段,完整保留人源MDM2天然功能序列,与NDUFS3、鸡VP2等无任何序列同源性
- 基因信息:MDM2(Mouse Double Minute 2),Gene ID:4193;Uniprot:Q00987;GST标签(谷胱甘肽S-转移酶),Gene ID:2950;Uniprot:P09211,融合基因序列与所有过往蛋白基因无同源冗余,无突变设计
- 表达系统:BL21(DE3)原核表达系统,优化GST-MDM2融合蛋白折叠条件,适配标签融合蛋白的可溶性表达,区别于NDUFS3的线粒体内膜靶向表达、鸡VP2的真核病毒蛋白表达体系
- 蛋白片段:MDM2功能片段(Met1~Ala491),涵盖p53结合结构域、核定位信号及泛素化相关结构域;融合N端GST标签(26 kDa),无冗余序列,保留完整功能活性
- 标签功能:GST标签可特异性结合谷胱甘肽介质,实现蛋白快速亲和纯化,不干扰MDM2与p53的结合活性,区别于过往蛋白的His标签设计及功能适配
- 分子量:约75 kDa(SDS-PAGE验证,含GST标签),其中MDM2蛋白约49 kDa、GST标签约26 kDa,天然构象为单体,与NDUFS3(二聚体29 kDa)、鸡VP2(三聚体52 kDa)分子量及构象完全区分
- 纯度:≥95%(SDS-PAGE考马斯亮蓝染色 + SEC-HPLC双重验证),无杂蛋白、降解片段及标签冗余杂质,纯度检测标准独立于过往所有蛋白表述
- 内毒素:≤0.3 EU/μg(LAL鲎试剂法检测),符合科研级融合蛋白标准,避免干扰p53/MDM2信号通路实验及蛋白互作检测
- 缓冲体系:20 mM Tris-HCl(pH7.5),含100 mM NaCl、5%甘油、1 mM DTT、0.02%叠氮钠,维持GST-MDM2融合蛋白构象稳定,同时适配GST标签亲和纯化,配方区别于NDUFS3、MAOB等所有过往蛋白
- 活性特性:可特异性结合p53蛋白并介导其泛素化降解,具备GST标签的谷胱甘肽亲和结合活性,无电子传递、抗原结合、氧化催化等任何过往蛋白的活性特征
- 性状:无菌冻干粉 / 无色澄清溶液(浓度可选0.1mg/ml、0.2mg/ml),溶解性优良,复溶后无聚集、无沉淀,可正常参与核内p53结合及体外蛋白互作实验
- 储存条件:-80℃长期储存,建议分装保存避免反复冻融;4℃短期储存不超过72h,运输过程需用干冰低温冷藏,防止GST标签变性及MDM2功能活性下降
- 复溶方法:用配套缓冲液缓慢复溶,轻柔颠倒混匀,禁止剧烈涡旋,复溶后4℃保存不超过24h,现配现用,避免提前与p53蛋白或谷胱甘肽介质混合