一、基本背景

• CAMKK1：钙 / 钙调素依赖的丝 / 苏氨酸蛋白激酶，属 CaM 激酶信号通路，可磷酸化激活 CAMK1、CAMK4 等，调控细胞凋亡、免疫应答、神经信号传导等。
• UniProt：Q8N5S9
• 全长：约 520 aa

二、常见标签与构建形式

1. His‑tag（6× 组氨酸）
   • 位点：N 端 / C 端
   • 表达系统：昆虫细胞（杆状病毒）、大肠杆菌
   • 用途：Ni‑NTA 亲和纯化、WB/ELISA 检测
   • 产品示例：Thermo PV4671（全长，59.8 kDa）
2. GST‑tag（谷胱甘肽 S‑转移酶）
   • 位点：N 端
   • 表达系统：小麦胚芽提取物、大肠杆菌
   • 用途：GSH 亲和纯化、提高可溶性、下拉实验
   • 区域：常为 1–520 aa、321–520 aa
3. Flag‑tag（DYKDDDDK）
   • 位点：N 端（常与 Myr 豆蔻酰化序列联用）
   • 载体：pWZL Neo Myr Flag CAMKK1（Addgene #20442）
   • 用途：免疫沉淀、荧光定位、激酶活性分析
4. Myc/DDK‑tag
   • 表达系统：HEK293T（真核，更接近天然修饰）
   • 用途：WB、IP、共定位