PKR (Phospho?Thr446) 抗体是特异性靶向 PKR 蛋白第 446 位苏氨酸磷酸化位点的工具抗体,多用于细胞信号与分子机制研究,不用于临床诊断。
基本特性
靶标:PKR(EIF2AK2),一种干扰素诱导的 RNA 依赖蛋白激酶,分子量约 74 kDa。
免疫原:人工合成的磷酸化肽段,序列围绕人源 PKR Thr446 位点(K?R?T (p)?R?S)。
宿主与类型:多为兔源 IgG,分多克隆与单克隆两类;单抗批次稳定性更优。
特异性:仅识别 Thr446 磷酸化的内源性 PKR,不结合非磷酸化蛋白或其他位点磷酸化亚型。
种属反应性:可识别人、小鼠、大鼠等样本中的磷酸化 PKR。
制备与纯化
多克隆抗体通过兔免疫后血清采集,经蛋白 A 与抗原肽亲和层析纯化;单抗由杂交瘤技术制备,再经亲和纯化,纯度高、特异性强。
应用场景
蛋白质印迹(WB):推荐稀释比 1:500–1:1000,检测细胞 / 组织裂解液中磷酸化 PKR。
免疫沉淀(IP):可富集磷酸化 PKR 及其复合物,用于互作蛋白分析。
免疫荧光(IF)/ 免疫细胞化学(ICC):观察磷酸化 PKR 的亚细胞定位。
免疫组化(IHC):检测组织切片中靶标表达与活化水平。
储存与稳定性
缓冲液:含 50% 甘油、0.5% BSA 与防腐剂的 PBS(pH 7.4)。
保存条件:短期 4℃,长期?20℃,避免反复冻融;?20℃可稳定保存 12 个月以上。
浓度:通常 1 mg/mL,规格有 50 μL、100 μL 等。
质量控制
经 WB、IP 验证,条带清晰、背景低;
肽段封闭实验确认磷酸化特异性;
严格质控确保批次间一致性与可重复性。